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單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒?操作步驟

更新時間:2021-11-24點擊次數:1311

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒操作步驟:

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變

化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。

④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

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Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

QBC-939, 人膽管癌細胞

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SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

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WM451, 人黑色素瘤細胞

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Hela, 人宮頸癌細胞系

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SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞

HEC-1A, 人子宮內膜癌細胞系

Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞


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