小鼠ELISA試劑盒的競爭法實驗步驟分析

　　小鼠ELISA試劑盒定量測定人血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中相關物質含量。常用方法包括雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。今天我們來聊聊競爭法，競爭法測抗體有多種模式，可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結合，洗滌后再加入酶標抗體，與結合在固相上的抗原反應，抗HBe的檢測一般采用此法。
 

　　小鼠ELISA試劑盒的競爭法實驗步驟如下所述：
 

　　1.以稀釋液將待檢標本做適當稀釋(預試中確定)加入包被有已知抗原的酶標板中(50ul/孔)，加封口膠帶于37℃作用30min；
 

　　2.棄反應液，以沖洗液連續洗板5次并于吸水紙上拍干；
 

　　3.加入酶標抗體(濃度在預試中確定)。加封口膠帶后于37℃作用30min；
 

　　4.重復第2步；
 

　　5.加底物(濃度在預試中確定)，小鼠ELISA試劑盒加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min，其間不時觀察，顯色滿意后加終止液50ul/孔；
 

　　6.在酶標儀中測定OD值，OPD用492nm測定，TMB用450nm測定。