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      莫氏立克次氏體PCR檢測試劑盒規格

      產品簡介

      莫氏立克次氏體PCR檢測試劑盒規格
      上海聯祖生物相關產品:
      TI檢測試劑盒每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔

      更新時間:2021-03-13
      訪問次數:590
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      注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

       產品名稱

       莫氏立克次氏體PCR檢測試劑盒規格

       英文名稱

       Rickettsia mooseriPCR

       貨號

       LZP7232

      實驗過程:
      一、試劑準備
      1. DNA模板
      2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
      4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
      6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
      推薦循環條件:
      1循環 50℃ for 2 min
      預變性 1循環 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
      組成及試劑配制:
      1、酶標板:一塊(96孔)
      2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      Aldosterone硫酸鎂,七 GR,99.5%對硝基氯苯 CP,98%

      Trimethyl orthoacetate無硫酸鎂 CP對硝基氯苯標準溶液 1.02mg/ml,基體:甲

      Ginseside Rb1莫能霉素鈉 97%對硝基氯苯 GR,99.5%

      Ginseside Rb2氯甲酸丁酯 98%對硝基氯苯 分析標準品,用于環境分析

      Ginseside Rb3氯甲酸芐酯 96%2,4-二硝基氯苯 GR,99%()

      Ginseside Rg14-異酸酯 98%愈創木酚  >99.0%(GC)

      Ginseside Rg2環己基異酸酯  98%鄰苯二胺 AR,98%

      Ginseside Rg3綠麥隆 分析標準品鄰苯二胺 99%,用于生化研究

      Ginseside Re綠麥隆標準溶液 100μg/ml,u=4%香草 AR,99%

      Ginseside Rc綠麥隆標準溶液 10μg/ml,u=6% 1,4-二(反式+順式) 97%

      Ginseside Rd3,4-二氯苯異酸酯 97%順-2--1,4-二 98%

      Ginseside Rf2,4-二氯苯氧乙酸 97%辛酰氯 99%

      Ginseside Rh1二甲氨酰氯 97%反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)

      Ginseside Rh2N,N-二乙基氯甲酰胺  98%間氯苯甲酰氯 97%

      Naringin AR,99.0%()間苯二甲酰氯 99%

      (-)-Nicotine芴甲氧羰酰氯 98%對苯二甲酰氯 99%

      消膽胺樹脂;考來烯胺XIAP (D2Z8W) Rabbit mAbPKA gamma  蛋白激酶Aγ抗體

      蔗糖NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)PKA C alpha+beta  蛋白激酶C抗體

      D-海藻糖二Spi-B (D4V9S) Rabbit mAbPJA2/RNF131  環指蛋白131抗體

      SRC-1 Blocking PeptidePIWIL4  piwi樣4蛋白抗體

      鹽酸胍Caspase-11 (17D9) Rat mAbPIWIL3  piwi樣3蛋白抗體

      側金盞花,阿東糖,核糖TopBP1 (D8G4L) Rabbit mAbPiwil2/Mili  piwi樣2蛋白抗體

      酵母浸粉;酵母粉Phospho-EGF Receptor (Thr678) AntibodyPIWIL1/Miwi  piwi樣1蛋白抗體

      核糖核酸酶 A 溶液CD36 (D8L9T) Rabbit mAbPITX3  炎癥因子3抗體(穿透素)

      N,N'-亞甲基雙烯酰胺Di-Methyl-Histone H3 (Lys4) Blocking PeptidePITX2  成對樣同源結構域轉錄因子2抗體

      D-葡萄糖一MMP3 (D7F5B) Rabbit mAbPIRH2  泛素連接酶抗體
      莫氏立克次氏體PCR檢測試劑盒規格兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

      兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:250毫克

      兔去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

      兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

      兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25毫克

      兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25克

      兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

      兔溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

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