蛋白示蹤上樣緩沖液（非還原，5×）

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儀器：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/（比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：血清（漿）可直接測(cè)定。紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。=
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。

測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
大鼠精脲水解酶(AGMAT)ELISA試劑盒靈芝（紅芝）通關(guān)藤皂苷I

大鼠精氨酸酶1(ARG1)ELISA試劑盒*草菇L238通關(guān)藤皂苷G

大鼠精氨酸加壓素受體1A(AVPR1A)ELISA試劑盒#雙孢蘑菇知母皂苷Ａ１

大鼠精氨酸(Arg)ELISA試劑盒#茶薪菇通關(guān)藤皂苷H

大鼠緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒豬屎豆根瘤菌瓜子金皂苷己

大鼠緊密連接蛋白(Ocln)ELISA試劑盒#姬菇柳穿魚(yú)黃素

大鼠金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(MTP1)ELISA試劑盒黃硬皮馬勃戈米辛J

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蛋白示蹤上樣緩沖液（非還原，5×）2-脫氧-L-核糖0.1%呂氏堿性美藍(lán)染色液組織霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性同位素薄層色譜（TLC）檢測(cè)試劑盒白介素12A(IL12A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

2-脫氧-L-核糖0.4%呂氏堿性美藍(lán)染色液組織霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性同位素定量檢測(cè)試劑盒白介素12A(IL12A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

L-葡萄糖0.4%呂氏堿性美藍(lán)染色液組織霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性熒光薄層色譜（TLC）檢測(cè)試劑盒白介素12A(IL12A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

L-葡萄糖溴酚綠-基紅指示劑溶液組織霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性熒光定量檢測(cè)試劑盒白介素12(IL12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

L-葡萄糖溴酚綠-基紅指示劑溶液組織絡(luò)氨酸磷酸酶（TP）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒白介素11受體α(IL11Rα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

1,6-二磷酸果糖二鈣鹽藍(lán)溶液組織絡(luò)氨酸磷酸酶（TP）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒白介素11受體α(IL11Rα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

1,6-二磷酸果糖二鈣鹽藍(lán)溶液組織鎂離子濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒白介素11受體α(IL11Rα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

1,6-二磷酸果糖二鈣鹽飽和油紅O染色液組織鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒白介素11(IL11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。