ACLATP檸檬酸裂解酶測(cè)試盒微量法

商品介紹：

測(cè)定意義

ACL（EC4.1.3.8）是脂肪酸合成中的關(guān)鍵酶，其催化產(chǎn)生的乙酰輔酶可用于脂肪酸合成和碳鏈延長(zhǎng)、黃酮類物質(zhì)合成、氨基酸合成等。

測(cè)定原理：

ACL在ATP和輔酶存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰輔酶、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm測(cè)定NADH減少速率，計(jì)算ACL活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明！

特點(diǎn)：

1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成

2、靈敏度高，操作便捷

3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑

常見樣本處理方法：

1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量

（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議 500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液） ，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲 3s，間隔10s，重復(fù)30 次）8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，

加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

大鼠Ⅰ型前膠原羧端肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒Denhardt's溶液(50×)D-山梨 AR,98.0%2-羥-4-吡啶 98%

大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)檢測(cè)試劑盒磷緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂，RNase free)D-山梨 用于培養(yǎng)，≥98%4-氨苯酯 98.0%

大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)檢測(cè)試劑盒DEPC-PBS溶液(活躍)雌三 USP2,4,6-三 98%

大鼠S100蛋白(S-100)檢測(cè)試劑盒DNA性轉(zhuǎn)移緩沖液雌 97%式乙鋁 AR

大鼠S100蛋白(S-100)檢測(cè)試劑盒DTT-PBS溶液(10mmol/L)雌二 98%式乙鋁 CP

大鼠S100B蛋白(S-100B)檢測(cè)試劑盒Kodak F-5定影粉劑0.98四乙鉛 AR,90%

大鼠S100B蛋白(S-100B)檢測(cè)試劑盒Kodak F-5定影液4-()吡啶鹽鹽 97%磷 99.9%，8000目

大鼠白介素1(IL-1)檢測(cè)試劑盒Kodak D-19顯影粉劑2-吡啶 98%磷 99%

大鼠白介素1(IL-1)檢測(cè)試劑盒Kodak D-19顯影液2-吡啶 98%1,2-二(二硅)苯 98%

大鼠白介素1β (IL-1β)檢測(cè)試劑盒原位雜交A-B顯影液4-吡啶 97%1，4-二（二硅烷）苯 97%

大鼠白介素1β (IL-1β)檢測(cè)試劑盒SSC緩沖粉劑(20×)誘蟲烯 93%1，4-二（三硅烷）苯 96%

大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)檢測(cè)試劑盒SSC緩沖粉劑(20×)乙 農(nóng)殘級(jí), ≥99.9%(GC)芐三氫氧化銨 40%溶液

大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)檢測(cè)試劑盒SSC緩沖液(20×,pH7.0)己二二酰肼 98%1,4-二苯丁二炔 99%

大鼠血栓素B2(TXB2)檢測(cè)試劑盒SSC緩沖液(20×,pH7.0)N-叔丁烯酰 97%式碳鎂 CP

大鼠血栓素B2(TXB2)檢測(cè)試劑盒SSC緩沖液(20×,pH7.0,RNase free)正丁 for HPLC，≥99.7% (GC) 乙烯-POSS 99%

大鼠乙酰膽(Ach)檢測(cè)試劑盒SSC緩沖液(20×,pH7.4)正丁 農(nóng)殘級(jí)苯-POSS 98.5%
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